Postupak određivanja krvnih skupina prema ABO sustavuje identificirati antigene A i B u eritrocitima primjenom standardnih protutijela i upotrebom aglutinina u plazmi ili serumu krvi koja se analizira standardnim crvenim krvnim stanicama. Tehnika je razvijena početkom 20. stoljeća i još se aktivno koristi u medicini. Određivanje antigena A i B rezultat je anti-A i anti-B zeolitona.

Osnovni pojmovi

Donatori uvijek određuju ne samo antigeniu eritrocitima, ali također i aglutinina u serumu (plazmi) primjenom standardnih eritrocita. Venska krv koristi se kao biomaterija. Prije testiranja, morate odreći masne hrane dan prije testa i ne pušiti pola sata prije nego što uzmete test. Grupe krvi određuju se dva puta: prvo u odjelu za liječenje, gdje se materijal bere, a zatim potvrdio studija u laboratoriju.

određivanje krvnih grupa ne postoji na križnom putu

Definicija krvnih skupina prema ABO sustavu jeglavni test korišten u transfusiologiji. Također, u nekim životinjama postoji sličan sustav krvnih skupina, na primjer u čimpanzama, gorilama i bonobama.

Povijest otkrića

U znanosti, postoji opće prihvaćeni stav daMetoda određivanja krvne grupe ABO sustava otkriven je prvi put Karl Landsteiner, austrijski znanstvenik, 1900. godine. Zatim je u svom radu opisao tri tipa antigena. Tijekom da je trideset godina kasnije dobio je Nobelovu nagradu za medicinu i fiziologiju. S obzirom na činjenicu da je između znanstvenici nisu bili bliski veze, a kasnije je utvrdio da je češki liječnik Jan Jansky serološki bez obzira na istraživanja Karl Landsteiner prvi opisao četiri skupine ljudske krvi, ali njegova istraživanja nisu bili poznati široj publici. Trenutno, to je klasifikacija razvijen od strane J. Jansky, koji se koristi u Rusiji i bivšim sovjetskim republikama. U SAD-u je WL Moss stvorio sličan rad 1910. godine.

tehnika grupiranja krvi

Metoda određivanja krvnih skupina prema ABO sustavu korištenjem tsoliklonova

Grupa krvi treba biti određena u zatvorenom prostorudobra rasvjeta s temperaturom od 15 do 25 stupnjeva Celzija, budući da odstupanja od ove norme mogu utjecati na rezultate studije. Inicijale i prezime pacijenta napisane su na pločici ili ploči. S lijeva na desno ili oko kruga primjenjuje se standardna oznaka za skupine (O (I), A (II), B (III)). Ispod njih se odgovarajuće serume stavljaju kap po kap zasebnim pipetama za svaku vrstu. Onda im je dodana krv pacijenta. Materijal za istraživanje je preuzet iz usnice ili prsta. To zahtijeva tehniku ​​određivanja krvne grupe prema ABO sustavu.

Upotreba eritrocita,koji su u cjevčici nakon ugrušaka. Potrebno je da količina seruma bude veća od količine dodane desetke krvi. Nakon toga, kapi se miješaju sa staklenim štapićima (zasebno za svaki). U roku od pet minuta, lagano ljulja pločica, promatrajući pojavu reakcije hemaglutinacije. Nalazi se u činjenici da se pojavljuju male crvene grudice, spajajući se u veće. Serum u ovom trenutku gotovo potpuno gubi boju.

Kako bi se uklonila lažna hemaglutinacijajednostavno lijepljenje eritrocita, potrebno je nakon tri minute dodati jednu kapljicu fiziološke otopine i provjeriti je li aglutinacija ostala. Ako je tako, onda je istina. Sve, definicija krvnih skupina prema ABO sustavu je završena na ovom.

definicija krvnih grupa pomoću otvorenog sustava

Tumačenje rezultata

Kao rezultat, mogu biti četiri reakcije:

  • nema aglutinacije s bilo kojim serumom - prvom skupinom O (I);
  • reakcija se očitovala sa sera I (ab) i III (a) - druga skupina A (II);
  • aglutinacija se javlja s serumima I (ab) i II (b) - trećoj skupini B (III);
  • ako se reakcija odvija s tri sera,Potrebno je provesti dodatnu proceduru s AB (IV) grupnim reagensima, koji su standardni; ako u takvoj padini nema aglutinacije, možemo pretpostaviti da je to četvrta krvna skupina AB (IV).

Express metoda Rh faktora

Metoda određivanja krvnih skupina prema ABO sustavu pretpostavlja simultano otkrivanje Rh faktora (Rh).

Površina ploče je prethodno navlažena ipišu na njemu "kontrolni serum" i "antiresus serum". Zatim se ispod natpisa stavljaju jedna ili dvije kapljice potrebnih reagensa, a njima se dodaju analizirani materijali. Da biste to učinili, možete koristiti krv iz prsta (u istoj količini kao i volumen seruma) ili crvene krvne stanice ostavljene na dnu cijevi nakon pojave ugruška (pola volumena seruma). Ne utječe na izbor materijala za konačni rezultat. Zatim se krv i serum pomiješaju sa suhom staklenom šipkom, nakon čega čekaju da se reakcija odvija pet minuta. Da bi se uklonile lažne očitanja, nakon tri do četiri minute, dodaje se izotonična otopina natrijevog klorida (samo nekoliko kapi). Često se provodi određivanje krvne grupe prema ABO i Rh sustavu.

algoritam za određivanje krvne grupe od strane otvorenog sustava

Ako aglutinacija eritrocita u kapi spojavljuje se serum, to ukazuje na pozitivnu Rhesusovu krv. Prema statistikama, Rh + javlja se u 85% svjetske populacije. Nedostatak nam omogućuje da govorimo o Rh-negativnoj pripadnosti. Ako aglutinacija pojavio kontrolnog seruma, tako da je pao u zapuštenost. Nažalost, algoritam za određivanje krvnih grupa ABO sustava ne uvijek rade savršeno.

Koje se pogreške može napraviti s ovom tehnikom?

Netočnoće u određivanju krvi pripadaju određenoj skupini ovise o sljedećim razlozima:

  • Tehnička.
  • Biološka specifičnost krvi.
  • Nepotpuna priroda standardnih seruma i eritrocita.

Tehničke pogreške

Moguće pogreške u određivanju krvne grupe ABO sustava na križ način:

  • Neispravan serum na ploči.
  • Pogrešni kvantitativni omjeri materijala.
  • Korištenje nedovoljno čistih ploča iliploče koje dolaze u doticaj s krvlju (svaki se serum sakuplja odvojenom pipetom koja se treba prati otopinom natrijevog klorida (koncentracijom od 0,9%)).
  • Neispravan zapis analiziranog materijala.
  • Nepridržavanje vremena potrebnog zaPojava aglutinacije - požurite i uzeti u obzir odgovor na isteku pet minuta ne bi trebalo biti, jer u krvi može biti tihi aglutinogene. Pretjerivanje također nije neophodno, jer se kapi mogu osušiti s rubova i dovesti do lažnog zaključka. Važno je slijediti pravila za određivanje krvne grupe prema ABO sustavu.
    određivanje krvnih skupina pomoću otvorenog sustava korištenjem standardnih seruma
  • Pogrešna centrifugacija također može dovesti do pogrešnog rezultata.
  • Temperatura zraka je veća od dopuštenog,utječe na odsutnost aglutinacije. Da biste izbjegli pogreške takve vrste, trebate koristiti poseban serum koji je dizajniran za rad u vrućim podnebljima. Odredite skupine krvi na ploči ili ploči, čija vanjska površina pada u hladnu vodu.

Pogreške u biološkoj specifičnosti

Pogreške povezane s biološkom specifičnošću analizirane krvi podijeljene su u dvije vrste.

  • Ovisno o karakteristikama crvenih krvnih stanica.
  • Pogreške zbog biološke osobine seruma.

Razmotrimo svaku vrstu detaljnije.

Ovisno o karakteristikama crvenih krvnih stanica

  • Kasna aglutinacija, zbog "slabog"oblike eritrocita i antigena. Kako bi se izbjegle pogreške, potrebno je utvrditi krvnu skupinu donatora i primatelja koji koriste standardne eritrocite. Odredite aglutinogen A2 treba preispitati s drugim vrstama reagensa i ostalih jela, što povećava vrijeme snimanja reakcije.
  • "Panaglutinacija" ("autoaglutinacija") - vještinakrvi pokazuju istu reakciju nespecifične prirode sa svim serumima, uključujući i svoje. Nakon pet minuta, oštrina takve aglutinacije slabi, iako se treba intenzivirati. Slični slučajevi opaženi su u bolesnika s rakom, spaljeni itd. Kao kontrola potrebno je procijeniti manifestaciju aglutinacije analiziranih eritrocita u standardnom serumu četvrte skupine i slanoj otopini. Kod "panaglutinacije" krvna skupina se određuje kao rezultat trostrukog pranja eritrocita. Ako ne daje željeni rezultat, potrebno je ponovno uzimati uzorak uzorka krvi u prethodno zagrijanoj epruvetu i postaviti uzorak u termo posudu kako bi se održala temperatura od 37 stupnjeva Celzija i više. Potom treba isporučiti u laboratorij gdje se održava gore navedena temperatura i zagrijava fiziološka otopina, ploča i reagensi.

pravila za određivanje krvne grupe od strane otvorenog sustava

  • Ponekad se analiziraju crvene krvne stanice krviraspoređeni su kao "kovanice" i mogu se uzeti kao aglutinati. Ako dodate dvije kapi izotonične otopine i lagano protresite tanjur, crvene krvne stanice uzeti ispravnu poziciju.
  • Nepotpune ili miješani aglutinacija, javljaju u bolesnika s drugim, trećim i četvrtim skupine kao rezultat transplantacije koštane srži ili u prva tri mjeseca transfuzijom 0 (I).

Zbog biološke osobine seruma

  • Tijekom redovitog testiranjaprethodna osjetljivost otkrila je protutijela različite specifičnosti. Moramo ga odrediti i pokupiti crvene krvne stanice bez sadržaja antigena na koji se otkriva imunizacija. Primatelj mora nužno odabrati kompatibilnu krvnu donatora pojedinačno.
  • Nema antitijela A i B, koja se primjećuje kod novorođenčadi i pacijenata koji pate od ugnjetavanja humoralnog imuniteta.
  • Prilikom oblikovanja "kovanica" anomalnarezultat se mora potvrditi uzimanjem standardnih crvenih krvnih stanica prve skupine. Otopina natrijevog klorida i ljuljanje ploče pomoći će razlikovati prave aglutinate i "kovanice".
    određivanje krvnih grupa pomoću otvorenog sustava uz pomoć toluola

Pogreške povezane s primjenom inferiornih standardnih eritrocita i sera

Slabi serumi s prošlošću vremena ili titar manji od 1:32 mogu pokrenuti slabu i kasnu aglutinaciju. Korištenje takvih reagensa je neprihvatljivo.

Korištenje neodgovarajućih standardnih crvenih krvnih stanicaili sirutka, pripremljena pod ne sterilnim uvjetima i konzervirana nedovoljno, dovodi do pojave "bakterijske" aglutinacije, koja je od nespecifične prirode.

Postoje mnoge popularne pretpostavke okrvne grupe ABO sustava, koje su se pojavile odmah nakon otkrivanja u različitim svjetskim kulturama. Tako, na primjer, u tridesetima prošlog stoljeća u Japanu i nekim drugim zemljama, teorija koja je povezivala grupu krvi s jednom ili drugom vrstom osobnosti dobila je popularnost. Slične teorije danas su popularne.

Postoji i mišljenje da osoba koja ima skupinu A podložna ozbiljnoj mamurluku, O povezana je s dobrim zubima, a skupina A2 - s najvišom razinom IQ. Ali takve tvrdnje nisu znanstveno dokazane.

Ispitali smo definiciju krvnih skupina pomoću ABO sustava koristeći standardne serume.

</ p>